Padronização fitoquímica de espécies de miconia para o desenvolvimento de insumos farmacêuticos ativos vegetais (IFAVs): aplicação de clae-em na identificação e quantificação dos compostos bioativos

Introdução

O uso de plantas medicinais permanece como uma prática relevante, especialmente em países em desenvolvimento, devido à presença de metabólitos especializados com potencial farmacológico. No Cerrado, espécies do gênero Miconia se destacam, sobretudo M. albicans (canela-de-velho), tradicionalmente utilizada no tratamento de artrite e artrose e com atividade anti-inflamatória demonstrada in vitro e in vivo. Entretanto, M. fallax e M. stenostachya apresentam elevada similaridade morfológica com M. albicans, dificultando sua identificação. Assim, a caracterização e padronização química dessas espécies são fundamentais para estabelecer marcadores, diferenciar perfis metabólicos e garantir o uso seguro de M. albicans na obtenção de IFAVs.

Objetivo

Desenvolver um método por CLAE-IES-QQQ-EM para quantificar marcadores químicos em espécies de Miconia, avaliar a influência da sazonalidade no potencial antioxidante e comparar, por metabolômica, os perfis de M. albicans, M. fallax e M. stenostachya com um extrato comercial.

Método

Foram realizadas três coletas de M. albicans, M. fallax e M. stenostachya. As folhas foram secas, trituradas e extraídas por maceração com etanol, seguidas de filtração, concentração, liofilização e armazenamento. A prospecção fitoquímica foi realizada por CCD e a atividade antioxidante pelo método DPPH•, com determinação de IC50. Cinco padrões analíticos foram quantificados por CLAE-IES-QQQ-EM, utilizando coluna C18 e monitoramento MRM. A análise metabolômica da terceira coleta foi conduzida por CLAE-IES-TOF-EM. Os dados foram processados no Mass Profiler Professional e submetidos a PCA, ANOVA one-way com correção de Bonferroni-Holm e análise de fold change ≥ 2, utilizando M. albicans como referência.

Resultados e discussão

Os extratos apresentaram rendimentos de 7,14 e 11,26% entre as coletas, e a prospecção fitoquímica evidenciou flavonoides, terpenos, esteroides e compostos fenólicos. M. albicans apresentou maior atividade antioxidante (2,98 - 4,18 μg/mL), seguida por M. fallax ( 5,45 - 7,11 μg/mL) e M. stenostachya (9,73 - 19,60 μg/mL), sendo nesta última observada maior efeito da sazonalidade. A análise metabolômica revelou clara separação entre as espécies, com PCA explicando 71,49% da variabilidade total. A clusterização hierárquica confirmou maior proximidade química entre M. albicans e M. fallax, maior distanciamento de M. stenostachya e forte separação do extrato comercial de M. albicans, que não apresentou proximidade metabólica com a espécie coletada. O método quantitativo apresentou elevada linearidade (R² ≥ 0,99) e revelou variações sazonais importantes na concentração dos compostos. Ácido gálico (2,28 - 4,12 mg/gextrato) e rutina (1,83 - 2,22 mg/gextrato) foram mais abundantes em M. albicans e demonstraram potencial como marcadores químicos para diferenciação das espécies. Catequina (0,81 - 1,46 mg/gextrato) foi mais elevada em M. stenostachya, enquanto ácido elágico (0,52 - 0,82 mg/gextrato) apresentou maior abundância em M. albicans. A quercetina, devido às baixas concentrações, não mostrou potencial como marcador.

Conclusão

O estudo diferenciou quimicamente M. albicans, M. fallax e M. stenostachya, evidenciando perfis distintos e pouca influência da sazonalidade na atividade antioxidante. O método por CLAE-IES-QQQ-EM demonstrou robustez, identificando variações entre espécies e coletas. Ácido gálico e rutina destacaram-se como marcadores de M. albicans, reforçando a importância da padronização fitoquímica para autenticação e controle de qualidade no desenvolvimento de IFAVs.

Palavras-chave

• Padronização fitoquímica
• Marcadores químicos
• Sazonalidade