Efeito anti-inflamatório do resveratrol em células mononucleares do sangue periférico de pacientes com doença pulmonar obstrutiva crônica

Introdução

A doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) é uma das principais causas de morte e incapacidade, caracterizada pela obstrução persistente do fluxo aéreo e inflamação pulmonar. O tabagismo é seu principal fator de risco, além da exposição a poluentes, fumaça passiva e agentes ocupacionais. A inflamação crônica e o estresse oxidativo contribuem para a progressão da doença e resistência aos corticosteroides. Nesse contexto, o resveratrol apresenta propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias, reduzindo citocinas inflamatórias e a ativação do NF-κB em estudos experimentais. Entretanto, apesar dos resultados promissores, as evidências clínicas ainda são limitadas, sendo necessários estudos para confirmar sua eficácia terapêutica.

Objetivo

O projeto tem como objetivo avaliar os efeitos do resveratrol em pacientes com DPOC em parâmetros pulmonares e inflamatórios, analisando a concentração de citocinas no sobrenadante de cultura e verificando a via de sinalização.

Método

A pesquisa foi realizada no Laboratório de Imunofarmacologia Experimental (LIFE) e Ambulatório Maria da Glória/Hospital de Clínicas da UFTM, sendo aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Humana da UFTM, sob parecer do CEP de número 5.406.028. Foram analisados 20 indivíduos, sendo 10 do grupo controle (saudáveis) e 10 com DPOC grau C ou D, com base na Iniciativa Global para Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica, que correspondem à presença de sintomas e exposição de fatores de risco. Os indivíduos saudáveis foram recrutados entre alunos e funcionários da UFTM, e os pacientes foram selecionados no Ambulatório de Pneumologia da UFTM. Foi realizado o isolamento de células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), colhidas por punção venosa, e foram isoladas através do gradiente de densidade Ficoll-Hypaque, em condições estéreis, utilizando-se capela de fluxo laminar. Após o isolamento, as PBMCs foram tratadas ou não com resveratrol (10-4M a 10-8M) 30 minutos antes da estimulação com LPS, e foram avaliadas as concentrações de citocinas e via de sinalização NF-kB após 24 horas. As citocinas IL-8 e IL-10 presentes no sobrenadante da cultura de PBMCs foram dosadas por ensaios imunoezimáticos (ELISA), e a via de sinalização NF-kB foi avaliada por citometria. Todos os dados obtidos foram analisados com o auxílio do software FlowJo.

Resultados e discussão

O resveratrol reduziu a produção de IL-8 e não alterou a produção de IL-10, e sem demonstrar efeito citotóxico em PBMCs de indivíduos controles estimuladas com LPS. Todas as doses de resveratrol não foram tóxicas, enquanto as células estimuladas com LPS aumentaram a produção de IL-8 e IL-10. Nessas células, após serem tratadas com resveratrol nas doses de 10-4M e 10-5M reduziram a concentração de IL-8. Não houve alteração significativa na concentração de IL-10 nas PBMCs de indivíduos controle estimulados com LPS e tratadas com resveratrol quando comparado com as células estimuladas com LPS.

Conclusão

Os resultados indicam que o resveratrol não apresentou citotoxicidade e demonstrou efeitos anti-inflamatórios.

Palavras-chave

• Resveratrol
• COPD
• PBMCs