Produção de biofilme e perfil de virulência de Enterococcus faecium resistentes à vancomicina obtidos de pacientes com infecção ou colonizados

Introdução

Enterococcus faecium é uma bactéria oportunista de relevância clínica e responsável por infecções graves em pacientes hospitalizados. As linhagens de E. faecium resistente à vancomicina (VREfm) têm se destacado devido à sua habilidade de adquirir resistência a múltiplos antimicrobianos. Adicionalmente, fatores de virulência contribuem para a sobrevivência desse microrganismo no ambiente hospitalar e para a patogênese. Esses determinantes de virulência estão associados a uma maior capacidade do E. faecium em aderir aos tecidos do hospedeiro e têm sido implicados na formação de biofilme, que é considerado um fator chave na patogênese de infecções por enterococos.

Objetivo

Avaliar a produção de biofilme por isolados de VREfm obtidos de pacientes hospitalizados com infecção ou colonizados, determinar o perfil de sensibilidade aos antimicrobianos e detectar a presença de fatores de virulência.

Método

Os isolados de VREfm foram obtidos de pacientes internados no Hospital de Clinicas/UFTM. O perfil de sensibilidade aos antimicrobianos foi avaliado pelo método de disco difusão. Antimicrobianos de maior relevância terapêutica (ampicilina, gentamicina e estreptomicina) foram testados pelo método de diluição em caldo. Ambos métodos foram realizados e interpretados segundo diretrizes do CLSI (Clinical & Laboratory Standards Institute). Para detectar a produção de biofilme foi utilizado o método do cristal violeta, usando placas de 96 poços de poliestireno e quantificação pela densidade óptica para classificação dos VREfm em produtor (fraco, moderado ou forte) e não produtor. A produção de gelatinase foi avaliada pelo cultivo do isolado em meio BHI acrescido de gelatina 12%. A atividade hemolítica (alfa, beta ou gama) foi determinada em meio ágar sangue 5%. Os resultados obtidos foram analisados ​​usando o programa SPSS.

Resultados e discussão

Foram analisados 20 isolados de VREfm, de origem hospitalar, sendo 15 (75%) provenientes de infecção e 5 (25%) de swab retal (cultura de vigilância). Dentre os casos de infecção, o espécime clínico mais frequente foi urina (40%). Todos os VREfm também foram resistentes à ampicilina, penicilina, eritromicina e norfloxacina. No entanto, apenas um isolado foi resistente à tetraciclina e cloranfenicol. Para os aminoglicosídeos, a taxa de resistência de alto nível foi de 15% para estreptomicina e 30% para gentamicina. A resistência à ampicilina é comum entre os VREfm, semelhantemente ao observado em estudos realizados no Brasil e outros países. A maioria dos VREfm apresentou CIM ≥256ug/ml para vancomicina (100%; n=20) e ampicilina (85%; n=17). Alfa-hemólise (46,7%) e gama hemólise (40%) foram mais frequentes dentre os VREfm estudados. Com relação à produção de gelatinase, somente um (5%) VREfm apresentou essa enzima, condizente com outo estudo nacional que reportou baixa frequência dessa enzima em E. faecium (7,7%). Todos (100%) os VREfm estudados foram produtores de biofilme, diferentemente das taxas reportadas em estudos realizados na Polônia (72,7%), Turquia (48%) e Índia (25,2%).

Conclusão

Os dados obtidos confirmam que isolados de VREfm apresentam resistência a antimicrobianos de múltiplas classes, principalmente beta-lactâmicos, quinolonas e macrolídeos. Além disso, os VREfm apresentam diferentes fatores de virulência, como a formação de biofilme, o que reforça a capacidade de sobrevivência dessas linhagens no ambiente hospitalar e a necessidade de monitorar esse microrganismo multirresistente.

Palavras-chave

• Enterococcus faecium resistente à vancomicina
• Biofilme
• Gelatinase
• Hemolisina
• Fator de virulência